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P27蛋白试剂盒(ELISA方法)操作步骤和样本处理及要求
  • 公布日期:2018-11-30      扫瞄次数:144
    • P27蛋白试剂盒(ELISA方法)操作步骤:

      各试剂在使用前平衡至室温。

      1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。除空白孔外,余孔分别加标准溶液或待测样品100ul,轻轻混匀,37℃,120分钟。

      2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。

      3. 每孔加检测溶液A工作液 100ul,37℃,60分钟。洗板3次,350ul/每孔,甩干。

      4. 每孔加检测溶液B工作液 100ul,37℃,60分钟,洗板5次,甩干。

      5. 依序每孔加底物溶液90ul,37℃避光显30分钟。

      6. 依序每孔加终止溶液50ul,终止反应。用酶联仪在910nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 

      注:以上操作步骤为参考,大略操作步骤以ELISA试剂盒说明书为准。

      样本处理及要求
      1. 血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应幸免反复冻融。
      2. 血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1000g离心20分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应幸免反复冻融。
      3. 细胞培养物上清或其它生物标本:1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应幸免反复冻融。

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