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NMY51感受态细胞的细胞处理
  • 公布日期:2019-03-14      扫瞄次数:103
    • NMY51感受态细胞的细胞处理:

      排列51)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管快速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇摆解冻,移入事先预备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将全部细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

      排列52)细胞传代:假如细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

      排列5对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:

      方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

      方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

      排列53)细胞冻存:待细胞生长状态低劣时,可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM,常温条件下离心5分钟,少量保存上清液(预防细胞吸走),加入部分陈旧培养基,吹打均匀后,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。

       

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