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elisa试剂盒有哪些注重事项及操作步骤
  • 公布日期:2019-05-10      扫瞄次数:144
    •                                   elisa试剂盒有哪些注重事项及操作步骤
      elisa试剂盒注重事项:

      1.操作严格按照说明书进行,本试剂不同批号组分不得混用。

      2.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

      3.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

      排列54. 封板膜只限一次性使用,以幸免交叉污染。

      5.底物请避光保存。

      6.试验结果判定一定以酶标仪读数为准,使用双波长检测时,参考波长为 630nm

      排列57.全部样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为 2M 的硫酸,使用时一定注重安全。

      elisa试剂盒操作步骤:

      1.编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对比 2 孔、阳性对比 2 孔、空白对比 1孔(空白对比孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作不同)

      排列52.加样:分别在阴、阳性对比孔中加入阴性对比、阳性对比 50μl。然后在待测样品孔先 加样品稀释液 40μl,然后再加待测样品 10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,

      排列53.温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。

      4.配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用。

      5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此 重复 5 次,拍干。

      6.加酶:每孔加入酶标试剂 50μl,空白孔除外。

      排列57.温育:操作同 3。

      8.洗涤:操作同 5。

      9.显色:每孔先加入显色剂 A50μl,再加入显色剂 B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10 分钟.

      10.终止:每孔加终止液 50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

      排列511.测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止 液后 15 分钟以内进行。

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