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ELISA胜利秘笈在上海邦景
  • 公布日期:2019-07-05      扫瞄次数:77
    •                                     ELISA胜利秘笈在上海邦景

        ELISA试剂盒好处灵敏性高,高效性,吸附均匀,吸附性好,回收利用率高,是一款可以让您放心选购的ELISA试剂盒产品。 

      目前很多客户因为对品牌的信任度问题,主要还是选择国外原装进口,选择国产比较成熟的公司仍然是一个非常好的选择上海邦景ELISA试剂盒,是 你不二的选择。

      让技术员告诉你ELISA秘笈:

      1. 确定您的样本类型和试剂盒可以兼容

      常见样本类型有血清,血浆,细胞培养上清,假如是厂家实验验证过的,可根据产品说明购买使用。【注重:血浆制备用到的抗凝剂有 EDTA、柠檬酸盐、肝素等多种,相应的血浆性质存在差异,需单独确认兼容性】。

       一般样本,如尿液、胸腹水、脑脊液、灌洗液、泪液,组织匀浆液等,可能缺乏厂家数据支持,这并不是说试剂盒无法应用于这些样本,而是需要咨询有相关经验人士或自行实验验证可行性(如需进行掺入回收实验)。

       2. 试剂盒检测范围需要匹配样本中标志物浓度

      ELISA 试剂盒的定量检测范围需参考标准曲线,在标准曲线和浓度区间内属于线性范围,其中的值是可信和可定量的。浓度高于线性范围的样品要稀释到线性范围内来测量,而浓度低于线性范围的样品,其测量值不能用于计算浓度,只能用做参考。有一种常见的相关情况是:健康人样本中很多标志物的浓度偏低,测量值低于标准曲线值。

       3. 样本收集有讲究

      以血清为例,样本收集可参考试剂盒说明书,但需注重以下要点。样本尽量用无菌管收集,幸免细菌的酶类和代谢产品对结果的影响。采集过程要幸免溶血,因为红细胞溶讲解放的活性物质可能会影响检测。保存过程中如有沉淀,应离心后取上清液。样本若不马上测定,建议按照每次使用量分装保存在 -20℃,每次检测使用一管,即幸免交叉污染和反复冻融,有能保证检测结果的平行可比性。

      4. 实验前要预备好相应试剂

      5. 提前将全部试剂平衡到室温环境,这个过程大致需半小时左右。洗液是浓缩液,如有结晶析出,需完全溶解后再进行稀释。A、B 两管显色底物在使用前15分钟按 1:1 配成混合液。为保证蛋白标准品溶液配制质量,蛋白标准品为冻干粉,重溶前需将管子离心,加入说明书指定的缓冲液,慢速在摇床上摇匀或颠倒混匀,至少 15 分钟,不建议用枪头吹打。溶解后如需保存,按每次使用量分装后根据说明书要求的温度保存。梯度稀释蛋白标准品时,建议用聚丙烯管(对蛋白吸附力很低),每步都要充分混匀且更换新枪头,确保梯度错误性。

       5. 仪器设备的预备也必不可少

      相关设备包含移液器、洗板机/摇床和酶标仪。移液器的错误性对于ELISA实验结果的可靠性十分要害,需要确保定期校准保护。摇床的使用是为了让反应体系快速达到平衡,获得稳定、可重复的结果。不用摇床对实验通常的影响是,OD 值低,CV 大。酶标仪等设备使用前提前 15 分钟开机预热。

       6. 预实验:通常预实验包含全部标准曲线和小量样本。

      预实验有两个主要目的,一来是熟悉实验流程,发觉可能忽略的问题;二来是测试样本和试剂盒是否匹配,一旦躲藏不匹配的情况,不至于浪费过多样本。其它是对样品中目的分析物的丰度作一下大致了解,以确定合适稀释度。

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