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小鼠杂交瘤细胞注重事项和细胞培养步骤

点击次数:77 公布时间:2018/11/14
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小鼠杂交瘤细胞;注重事项: 
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。 
2. 粗心阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞状态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。 
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养过夜,隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力,假如证实细胞活力正常,请将细胞离心后用陈旧培养基再次贴壁培养;假如染色结果显示细胞无活力,请拍下照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 
4. 请客户用不同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 
5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和公司技术部沟通交流。 
6. 该细胞只能用于科研,不得用于临床应用。
小鼠杂交瘤细胞;HRP操作步骤细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件预备:
1、预备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。 
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中快速摇摆解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将全部细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。 
2、细胞传代:假如细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
 

 
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