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仓鼠/小鼠杂交瘤细胞 产品介绍

点击次数:78 公布时间:2018/11/16
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仓鼠/小鼠杂交瘤细胞 产品介绍

细胞株,通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有一般性质或标志物的培养物,是用单细胞分离培养或通过筛选的方法,由单细胞增殖形成的细胞群。

排列5如何培养仓鼠/小鼠杂交瘤细胞?

细胞培养是当前细胞生物学乃至整个生命科学研究与生物工程中基本的实验技术。

动物细胞培养为疫苗生产、药物研制与肿瘤防治等医学实践提供了全新的手段。细胞培养包含原核生物细胞,入细菌;真核单细胞生物,入酵母菌、四膜虫等;植物细胞与动物细胞的培养以及于此紧密相关的病毒的培养。

动物细胞培养

体外培养的细胞可分为原代细胞(primary culture cell)与传代细胞(subculture cell)。原代细胞是指机体取出后马上培养的细胞。有人把培养的第1代细胞与传10代以内的细胞统称为原代细胞培养,适应在体外培养下条件下延续传代培养的细胞称为传代细胞。

集中的细胞悬液在培养瓶中很快(在几十分钟至数小时内)就贴附在瓶壁上,这就称为细胞贴壁。

排列5集中呈圆球形的细胞一经贴壁就快速铺展并结尾有丝分裂,逐渐形成致密的细胞单层,称为单层细胞(sigle layer cell),这种培养方法称为单层细胞培养。

对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,快速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

假如漂浮的死细胞多,说明细胞有很多老化的,建议每次传代的时候,在用胰酶消化之前,用PBS将细胞漂洗一遍,胰酶消化的时间要把握好,37℃2-3min即可,及时终止反应,否则胰酶消化过度对细胞损伤较大,也会有很多死细胞躲藏的;吹打细胞的动作要柔和。

排列5体外培养的细胞,不论是元代细胞还是传代细胞一般不包吃体内原有的细胞状态。但大体可以分为两种基本状态:成纤维样细胞(fibroblast like cell)与上皮样细胞(epitbelial like cell)。此外还有一些可移动的游走细胞。

 
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