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白介素1检测试剂盒的方法

点击次数:31 公布时间:2019/6/24
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排列5白介素1检测试剂盒用于检测未知抗体的间接法:

用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜。次日洗涤3次。

加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对比)

于反应孔中,加入陈旧稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml, 37℃孵育30-60分钟,洗涤,zui后一遍用DDW洗涤。

加底物液显色:于各反应孔中加入长期配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。

终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。

排列5结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对比孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对比OD值的2.1倍,即为阳性。

 
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