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小鼠肿瘤坏死因子试剂盒使用说明书

点击次数:33 公布时间:2019/7/4
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                          小鼠肿瘤坏死因子试剂盒使用说明书

雾,漫漫涨涌起来,涨涌起来。啊,好大的雾呵!远处,大雾布满,沉没了群山,只露出些隐隐约约的轮廓。不知是什么时候,雾海中现出奔腾的雄狮、悠闲的骆驼、开屏的孔雀、沉睡的老虎……雾竟有如此奇异的力量,它单调多彩,变幻莫测,是它给这群山削减了无穷的魅力;近处,芳草青碧,翠林如海,苍黛凝重。进口小鼠肿瘤坏死因子试剂盒躲藏的操作有关,本文与大家聊一聊好处及说明书。

操作步骤

1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀

释。

 

800 ng/L 

400 ng/L 

200 ng/L 

100 ng/L 

50 ng/L 

 

5 号标准品

4 号标准品

3 号标准品

2 号标准品

1 号标准品

 

150µl 的原倍标准品加入 150µl 标准品稀释液

150µl 的 5 号标准品加入 150µl 标准品稀释液

150µl 的 4 号标准品加入 150µl 标准品稀释液

150µl 的 3 号标准品加入 150µl 标准品稀释液

150µl 的 2 号标准品加入 150µl 标准品稀释液2. 加样:分别设空白孔(空白对比孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作不同)、标准孔、

待测样品孔。在酶标包被板上标准品错误加样 50µl,待测样品孔中先加样品稀释液 40µl,

然后再加待测样品 10µl(样品最终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽

量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3. 温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。

4. 配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此

重复 5 次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂 50µl,空白孔除外。

7. 温育:操作同 3。

8. 洗涤:操作同 5。

9. 显色:每孔先加入显色剂 A50µl,再加入显色剂 B50µl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色

15 分钟.

10. 终止:每孔加终止液 50µl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止

液后 15 分钟以内进行。

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 
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