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牛病毒检测试剂盒elisa试剂盒操作步骤
  • 公布日期:2019-03-20      扫瞄次数:39
    •    牛病毒检测试剂盒elisa试剂盒操作步骤:
        1.编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对比 2 孔、阳性对比 2 孔、空白对比 1孔(空白对比孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作不同)。
        2.加样:分别在阴、阳性对比孔中加入阴性对比、阳性对比 50μl。然后在待测样品孔先 加样品稀释液 40μl,然后再加待测样品 10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
        3.温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
        4.配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用。
        5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此 重复 5 次,拍干。
        6.加酶:每孔加入酶标试剂 50μl,空白孔除外。
        7.温育:操作同 3。
        8.洗涤:操作同 5。
        9.显色:每孔先加入显色剂 A50μl,再加入显色剂 B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10 分钟。
        10.终止:每孔加终止液 50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
        11.测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止 液后 15 分钟以内进行。
        牛病毒性腹泻—黏膜病可以穿过胎盘感染,一般是怀孕早期。牛病毒性腹泻—黏膜病毒血清抗体阴性的母牛一旦感染,经常通过胎盘使胎儿产生免疫抑制,引起延续性病毒血症,假如小牛正常产出,病毒血症能延续地带入成年期,这种牛临床貌似健康,血清中又无保护性抗体,但体内终究带毒,是牛群中最安全的传染源。在自然条件下,病毒是经口、鼻侵入宿主体内的。病毒首先在甲状腺腺窝上皮细胞中生殖,病毒或被病毒感染的细胞被巨噬细胞吞噬后转移到导管淋巴组织。牛病毒检测试剂盒可以错误的检测出牛是感染什么病毒,并且能援助及时治疗幸免不必要的损失。
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